如果液相色譜儀系統(tǒng)壓力過高,首先判斷壓力產(chǎn)生的位置,然后采用分段拆卸的方法進(jìn)行判斷一般從后向前拆,首先斷開色譜柱與檢測器的連接,壓力不會(huì)明顯下降或下降,檢測器不會(huì)被堵塞,檢測器也不會(huì)被堵塞;然后拆色譜柱,壓力會(huì)明顯下降,色譜柱會(huì)有問題,否則泵的出口會(huì)堵塞,柱沒有問題。當(dāng)確定該列存在問題時(shí),有以下原因:
1.大量非洗脫物質(zhì)吸附在保護(hù)柱或柱頭上,如中藥樣品長期溶于甲醇或含有高分子材料和蛋白質(zhì)的樣品長期使用后,將流動(dòng)相中不能溶解的物質(zhì)在柱頭或保護(hù)柱中分離出來,堵塞色譜柱,增加柱壓。
2.將多元素泵與緩沖鹽溶液和有機(jī)相混合,緩沖液濃度過高或有機(jī)相比例過大時(shí),在柱頭上沉淀混合緩沖液,增加柱壓。
流動(dòng)相甲醇的比例在45%~60%之間流動(dòng)相粘度大柱壓高。
4.柱長時(shí)間不使用溶劑干燥使用的初始柱壓力升高。
5.長期不用液相色譜柱飽,色譜柱的溶液為水或低濃度甲醇濃度小于10%細(xì)菌在色譜柱中生長柱壓升高。
6.不開發(fā)及時(shí)清洗液相色譜柱的習(xí)慣未及時(shí)清洗上一次實(shí)驗(yàn)中的樣品殘留物。
7.用含緩沖鹽的流動(dòng)相更換流動(dòng)相前未用10%甲醇或水沖洗導(dǎo)致緩沖鹽在柱內(nèi)分離。
8.保護(hù)柱失效或太臟無法及時(shí)更換。