腸上皮概述了口服攝入的微生物和私人自身間隙環(huán)境之間的界面。 小腸上皮細(xì)胞通過跨膜模式識(shí)別受體能夠識(shí)別微生物配體（1）（2）（3）在防御病原微生物中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
現(xiàn)在，這種非自我認(rèn)識(shí)的功能結(jié)果被毫無定義，并且由該保護(hù)性鑒定啟動(dòng)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，效應(yīng)物和調(diào)節(jié)機(jī)制尚未*理解。
**近，德GBraunschweig（德G）的Helmholtz感染研究中心的基因調(diào)控和分化系的研究小組發(fā)表了一篇文章，介紹了基于小腸成熟細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)的新數(shù)據(jù)（4）。
本文介紹了詳細(xì)參考以前的出版物（5）并通過SV40大T抗原（TAg），Krüppel樣因子4（Klf4）的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)永生化的從小鼠E19.5胎兒獲得小腸上皮細(xì)胞的有效方法。和DNA結(jié)合抑制劑3（Id3）。 在該轉(zhuǎn)導(dǎo)后約兩個(gè)月，細(xì)胞顯示出無限增殖的無限增殖性狀，沒有衰老跡象超過一年，長(zhǎng)方體形狀，接觸依賴性生長(zhǎng)抑制和細(xì)胞單層形成。 這些細(xì)胞可以通過有限稀釋進(jìn)行冷凍解凍和亞克隆，表現(xiàn)為顯示腸上皮表型標(biāo)記的真正永生化細(xì)胞系，例如膜結(jié)合連接閉塞蛋白（ZO）-1（6），基底外側(cè)組織粘附E-鈣粘蛋白（7），間隙連接蛋白連接蛋白43（8），中間絲蛋白波形蛋白，NADPH氧化酶4（Nox4）和三個(gè)刷邊界酶，其支持吸收上皮的代謝功能：二肽基肽酶4 ），蔗糖異麥芽糖酶（ISI）和氨基肽酶N（APN），所有這些都已知由腸上皮細(xì)胞表達(dá)。 重要的是，當(dāng)這些細(xì)胞在反式孔插入物中培養(yǎng)時(shí)，它們顯示跨上皮電阻，指示在單層（9）的兩側(cè)之間形成緊密屏障的能力（提供腸內(nèi)內(nèi)腔和下面的組織）。
使用這種小腸粘膜的體外模型，作者顯示在存在覆蓋上皮細(xì)胞單層的介質(zhì)中稀釋的各種先天免疫配體（Toll樣受體（TLR）4和5配體，脂多糖（LPS）和鞭毛蛋白）所述細(xì)胞以表達(dá)Cxcl2和Cxcl5的劑量依賴性方式反應(yīng)。
他們還使用相同的方法來獲得小腸IFN報(bào)道子上皮細(xì)胞，現(xiàn)在來自轉(zhuǎn)基因小鼠，旨在研究這些細(xì)胞單層對(duì)IFN的反應(yīng)，以增強(qiáng)對(duì)病毒感染的保護(hù)。 用相同的永生化方案處理的這些細(xì)胞類似地作出反應(yīng)，并提供通過表達(dá)螢光素酶作為對(duì)INF刺激的細(xì)胞反應(yīng)的報(bào)告物響應(yīng)INF I和III的小腸粘膜的體外模型（IEC-Mx2Luc-10細(xì)胞） 10）。為了測(cè)試抗病毒保護(hù)，使用新城疫病毒（NDV）。 干擾素預(yù)處理的單層細(xì)胞培養(yǎng)物暴露24小時(shí)**80個(gè)血細(xì)胞凝集單位/ ml NDV。 通過NDV血凝素 - 神經(jīng)氨酸酶（HN）細(xì)胞表達(dá)的流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)感染水平進(jìn)行定量，顯示病毒在INF預(yù)處理的IECMx2Luc-10細(xì)胞中不復(fù)制，但在未處理的細(xì)胞中確認(rèn)，證明可以誘導(dǎo)保護(hù)性抗病毒條件在用IFN預(yù)處理后的IEC-Mx2Luc-10細(xì)胞中。 此外，用鼠傷（11）感染的IEC-Mx2Luc-10細(xì)胞也能夠產(chǎn)生IFN。 這些實(shí)驗(yàn)與來自細(xì)菌感染的IECMx2Luc-10細(xì)胞培養(yǎng)物的條件培養(yǎng)基與未感染的IECMx2Luc-10細(xì)胞培養(yǎng)物的混合的交叉測(cè)試一起顯示了小腸粘膜的這種體外復(fù)制物的*抗病毒保護(hù)性質(zhì)及其用于進(jìn)一步研究小腸上皮細(xì)胞的先天免疫保護(hù)作用。
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