關鍵詞:藿香精油;百秋李醇;氣相色譜法;含量測定
藿香是一種常用中藥材,為唇形科植物廣藿香Pogostemon cablib(Blanc) Benth.或藿香Agastache rugosa (Fisch. etMey.) O.Kuntze 的全草。其性微溫、辛,歸肺、脾、胃經。具有化濕和中,祛暑解表的功能。用于感冒暑濕,寒熱,頭痛,胸脘痞悶,嘔吐泄瀉,瘧疾,口臭。本文采用氣相色譜法對藿香油經分子蒸餾提取而得到的藿香精油中百秋李醇的含量進行測定。
1 儀器與材料
1. 1 儀器 氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測器(FID)、十萬分之一天平型色譜工作站。
1.2 試藥 百秋李醇對照品(由中國藥品生物制品檢定所供鑒別用百秋李醇經純化而得);藿香精油(由廣州市輕工研究所提供,批號: 1106、1107、1108 );內標物:正十二烷(色譜純) ;溶劑:乙酸乙酯(分析純)。
2 試驗與結果
2. 1 溶液制備
2.1.1 對照品溶液的配制 精密稱取百秋李醇對照品11.70mg,置20mL量瓶中,加入乙酸乙酯溶解至刻度,配制成0.5850mg/mL的百秋李醇對照液,準確移取此液1mL置10mL量瓶中,加入1mL正十二烷內標液,用乙酸乙酯稀釋至刻度,搖勻。取1μL進樣。
2.1.2 內標液的配制 精密稱取正十二烷(色譜純)適量,用乙酸乙酯溶解并定容至100mL,得0.5mg/mL正十二烷內標液。
2.1.3 供試品溶液的制備 精密稱取藿香精油25mg,用乙酸乙酯溶解并定容至25mL。準確移取此液1mL加1mL正十二烷內標液置10mL容量瓶中,用乙酸乙酯稀釋至刻度,搖勻。取1μL進樣。
2. 2 含量測定
2. 2. 1 色譜條件與系統適應性 用彈性交聯石英毛細管柱SE230(30m×0.25mn×0.25μm) ;進樣口溫度:210℃;柱溫80℃,以10℃/min一階升溫至120℃,保持10min;以5℃/min二階升溫至160℃,以10℃/min三階升溫至240 ℃,保持10min。氫火焰離子化檢測器(FID)溫度:300℃,正十二烷為內標,理論塔板數按百秋李醇計算應不低于30000,百秋李醇與內標物的分離度應大于2.0。
2. 2. 2 線性關系 精密移取0.5850mg/mL百秋李醇對照品液0.3、0.6、1.0、1.3、1.6、2.0mL置10mL 量瓶中,分別加入1mL正十二烷內標液,加乙酸乙酯稀釋至刻度,搖勻,取1μL進樣。以百秋李醇質量濃度(ρ)對百秋李醇與內標物的峰面積比回歸,得回歸方程y=0.02577+ 0.0156ρ,r=0.9997
結果表明,百秋李醇質量濃度在17.55～117.0mg/mL范圍內與峰面積比呈線性關系。
2. 2. 3 精密度試驗 精密移取1mL百秋李醇對照液0.5849mg/mL,加1.0mL正十二烷內標液,用乙酸乙酯稀釋至10mL,搖勻。取1μL進樣,連續進樣6次,結果RSD=1.3%(n=6),表明精密度良好。
2. 2. 4 穩定性試驗 精確稱取本品25.09mg,加乙酸乙酯溶解并定容到25mL,精密移取此液1mL 加1.0mL正十二烷內標液,加乙酸乙酯至10mL,搖勻。每隔2 h進樣1次測定百秋李醇含量,在10 h內測定結果RSD= 2.48% (n = 6) ,表明樣品溶液比較穩定。
2. 2. 5 重復性試驗 精密稱取同一批號本品6份,按“2. 1. 3”項下操作。同一批號樣品平行測定6次,其RSD = 2.23%(n=6),表明重復性良好。
2. 2. 6 加樣回收率試驗 精密稱取同一批號本品約12mg,置25mL 量瓶中,分別加入百秋李醇對照品5.601mg (7.001mg/mL,0.8mL)、7.001mg(7.001mg/mL 1.0mL) 、8.401mg(7.001mg/mL,1.2mL) ,用乙酸乙酯溶解并定容。上述溶液各取1mL 分別置10mL量瓶中,各加入1mL內標液用乙酸乙酯稀釋至刻度,搖勻。取1μL進樣。
2. 2. 7 樣品含量測定 對3 批(批號1106、1107、1108)本品按上述方法進行含量測定,結果百秋李醇的含量分別為57.35%、70.98%及63.68%。
3 討論
本試驗對水蒸氣蒸餾而得的藿香油,再經分子蒸餾技術處理所得的藿香精油中百秋李醇進行含量測定;本研究所建立的毛細管氣相色譜測定方法,具有精密度高、重復性和穩定性好等優點,可作為藿香精油質量控制的方法。
